
1. 明場(chǎng)
測量前,充分混勻細胞懸液(用1mL移液器反復吸打混勻10次),取出20μL勻速注入到對應的通道內。稍待片刻,點(diǎn)擊“計數”,設備自動(dòng)進(jìn)入聚焦曝光,數秒后顯示實(shí)時(shí)圖像,旋即彈出計數結果界面。
稀釋方法:通過(guò)輸入目標濃度和目標體積,自動(dòng)計算稀釋方法。
優(yōu)化設置:對細胞進(jìn)行直徑大小,閾值[1]的設門(mén),在新參數下再次計算。
直方圖:細胞直徑分布圖,結團分布圖。
顯示結果圖、查看原圖:原圖和結果圖查看切換。
2.臺盼蘭
測量前,充分混勻細胞懸液(用1mL移液器反復吸打混勻10次),取出10μL細胞懸液和臺盼蘭染液(10μL)1:1混勻,取出20μL勻速注入到對應的通道內。在該界面右上角選擇“算法曝光”,點(diǎn)擊“計數”,設備自動(dòng)進(jìn)入算法曝光和自動(dòng)聚焦,數秒后顯示實(shí)時(shí)圖像,旋即彈出計數結果界面?!岸ㄖ灯毓狻毖永m了上一次算法曝光的曝光值,直至再次進(jìn)行“算法曝光”。當更換臺盼蘭染料時(shí),首次測量請調整至“算法曝光”進(jìn)行。
3.AOPI
測量前,充分混勻細胞懸液(用1mL移液器反復吸打混勻10次),取出10μL細胞懸液和AOPI染液(10μL)1:1混勻,取出20μL勻速注入到對應的通道內。點(diǎn)擊AOPI,根據下面的規則選擇子app:
① 規則細胞和不規則細胞app:測正常大小的哺乳動(dòng)物細胞;
② pbmc app:測傳代的小細胞(背景干凈,非原代或組織裂解,或是血液提取的小細胞。如pbmc, T細胞均是分離純化的細胞類(lèi)型,無(wú)雜質(zhì),無(wú)碎片)。
③ 血液app:?jiǎn)渭毎麥y序多用這個(gè)app,適合原代,組織裂解,血液提取的細胞,如原代分離的pbmc,有雜質(zhì),富含碎片的樣本。
針對樣本對aopi不同的著(zhù)色效果,右上角設置了三檔曝光時(shí)間支持切換,在樣本著(zhù)色較淺的時(shí)候可以選擇“高”曝光來(lái)補償。
[1] Halo Counter 采用的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò )AI算法,“閾值”設定的越小,原則上識別的細胞越多。
[2] Halo Counter 計數板具備調節高度功能,請在測樣品前確認高度是否被人為修改。